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2018-06-29 12:06 |
長時程雙光子成像技術(shù)
摘要：雙光子成像（Two-Photon Imaging）技術(shù)以其優(yōu)越特性被廣泛用于活細胞動態(tài)三維成像，但光功率極高的短脈沖光對焦平面熒光分子嚴重的光漂白極大地影響了雙光子長時間成像的圖像質(zhì)量，針對雙光子熒光漂白問題，本文提出一種優(yōu)化光照的雙光子（Optimized Lighting-Two Photon，OL-TP）成像技術(shù)。通過預掃描獲取雙光子圖像分析高低閾值，以預設的高低閾值為標準優(yōu)化一幅圖像中不同區(qū)域的光照時長，利用掃描過程中記錄的熒光信息和光照時間信息可以重建OL-TP圖像，既保證信噪比又降低熒光漂白。重建的OL-TP圖像與傳統(tǒng)雙光子圖像基本一致，信噪比略有降低，但圖像并未失真。對110 nm的熒光小球樣本分別連續(xù)取30幅普通雙光子和優(yōu)化光照的雙光子圖像，到第30幅圖時，重建后的優(yōu)化光照雙光子圖像比普通雙光子圖像熒光漂白降低了28.86%。OL-TP通過優(yōu)化光照時間大幅降低雙光子成像的熒光漂白，使雙光子熒光顯微鏡能夠更好地對生物樣本進行長時間觀測。 Q52 bh'cuU
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關(guān)鍵詞 ： 雙光子顯微成像, 熒光顯微成像, 熒光漂白
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