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    [分享]熒光分光光度計(jì)的結(jié)構(gòu)與工作原理 [復(fù)制鏈接]

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    只看樓主 倒序閱讀 樓主  發(fā)表于: 2010-12-09
    關(guān)鍵詞: 熒光光度計(jì)激光
    熒光的發(fā)光原理可知,分子熒光光譜與激發(fā)光源波長無關(guān),只與熒光物質(zhì)本身的能級(jí)結(jié)構(gòu)有關(guān),所以,可以根據(jù)熒光譜線對(duì)熒光物質(zhì)進(jìn)行定性分析鑒別。 照射光越強(qiáng),被激發(fā)到激發(fā)態(tài)的分子數(shù)越多,因而產(chǎn)生的熒光強(qiáng)度越強(qiáng),測量時(shí)靈敏度越高。一般由激光誘導(dǎo)熒光測量物質(zhì)的特性比由一般光源誘導(dǎo)熒光所測的靈敏度提高2-10倍。 ;xUo(^t7>  
    B1Pi+-t  
    當(dāng)紫外光或波長較短的可見光照射到某些物質(zhì)時(shí),這些物質(zhì)會(huì)發(fā)射出各種顏色和不同強(qiáng)度的可見光,而當(dāng)光源停止照射時(shí),這種光線隨之消失。這種在激發(fā)光誘導(dǎo)下產(chǎn)生的光稱為熒光,能發(fā)出熒光的物質(zhì)稱為熒光物質(zhì)。 o\><e1P  
    KT 6 ppo  
    熒光分光光度計(jì)基本結(jié)構(gòu) vgDpo@fz8  
    F/1m&1t  
    1. 樣品室:通常由石英池(液體樣品用)或固體樣品架(粉末或片狀樣品)組成。測量液體時(shí),光源與檢測器成直角安排;測量固體時(shí),光源與檢測器成銳角安排。 SmvMjZ+7Y  
    9Nna-}e?W  
    2.激發(fā)單色器:置于光源和樣品室之間的為激發(fā)單色器或第一單色器,篩選出特定的激發(fā)光譜。 ShlTMTgS  
    2wPc yD  
    3.發(fā)射單色器:置于樣品室和檢測器之間的為發(fā)射單色器或第二單色器,常采用光柵為單色器。篩選出特定的發(fā)射光譜。 _ iDVd2X"H  
    oa=TlBk<  
    4.光源:為高壓汞蒸氣燈或氙弧燈,后者能發(fā)射出強(qiáng)度較大的連續(xù)光譜,且在300nm~400nm 范圍內(nèi)強(qiáng)度幾乎相等,故較常用。 BHU$QX  
    Zv@ Fr9m  
    5.檢測器:一般用光電管或光電倍增管作檢測器?蓪⒐庑盘(hào)放大并轉(zhuǎn)為電信號(hào)。 %CnNu  
    O0 Uh  
    分子的吸收光譜和產(chǎn)生熒光的機(jī)制:當(dāng)物質(zhì)分子吸收某些特征頻率的光子以后,可由基態(tài)躍遷至第一或第二電子激發(fā)態(tài)中各個(gè)不同振動(dòng)能級(jí)和各個(gè)不同轉(zhuǎn)動(dòng)能級(jí)。處于激發(fā)態(tài)的分子通過無輻射弛豫(例如,與其它分子碰撞過程中消耗能量,或者,對(duì)分子組織而言,誘發(fā)光化反應(yīng)而消耗能量等)降落至第一電子激發(fā)態(tài)的最低振動(dòng)能級(jí),然后再由這個(gè)最低振動(dòng)能級(jí)以輻射弛豫的形式躍遷到基態(tài)中各個(gè)不同的振動(dòng)能級(jí),發(fā)出分子熒光。然后再無輻射弛豫至基態(tài)中最低振動(dòng)能級(jí)。 A)j!Wgs^z  
    tux0}|[^'  
    幾乎所有物質(zhì)分子都有吸收光譜,但不是所有物質(zhì)都會(huì)發(fā)熒光。產(chǎn)生熒光必須具備以下條件: (C uM*-  
    ")txFe  
    ① 吸收了與本身特征頻率相同的能量之后的物質(zhì)分子,必須具有高的熒光效率。許多吸光物質(zhì)并不產(chǎn)生熒光,主要是因?yàn)樗鼈儗⑺漳芰肯挠谂c溶劑分子或其它分子之間的相互碰撞中,還可能消耗于一次光化學(xué)反應(yīng)中,因而無法發(fā)射熒光,即熒光效率很低。 ypGt6t(;  
    |*b-m k  
    ②該物質(zhì)分子必須具有與所照射的光線相同的頻率,這與分子的結(jié)構(gòu)密切相關(guān)。
     
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    只看該作者 1樓 發(fā)表于: 2012-03-13
    說的不夠詳細(xì),整體不錯(cuò)。
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    只看該作者 2樓 發(fā)表于: 2012-03-13
    ,上海凌光的做得不錯(cuò)。