激光掃描共焦
顯微鏡由顯微鏡
光學(xué)系統(tǒng),激光
光源,掃描裝置和檢測(cè)系統(tǒng)構(gòu)成,整套儀器由計(jì)算機(jī)控制,各部件之間的操作切換都可在計(jì)算機(jī)操作平臺(tái)界面中方便靈活地進(jìn)行。常用計(jì)算機(jī)為奔騰系列,內(nèi)存最好是64mb,以便于圖像的存取和運(yùn)算,軟件界面多數(shù)為windows或windows nt,后者圖象采集效率更高,軟件也可在互聯(lián)網(wǎng)上方便地更新。
TX7]$Wj lx"#S'^~ 1、顯微鏡
光學(xué)系統(tǒng) M^3pJ=;5 Tye[iJ 顯微鏡是lscm的主要組件,它關(guān)系到系統(tǒng)的成象質(zhì)量。通常有倒置和正置兩種形式,前者在活細(xì)胞檢測(cè)等生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用中使用更廣泛。顯微鏡光路以無(wú)限遠(yuǎn)光學(xué)系統(tǒng)為佳,可方便地在其中插人光學(xué)選件而不影響成象質(zhì)量和測(cè)量精度。
物鏡應(yīng)選取大數(shù)值孔徑平場(chǎng)復(fù)消色 差物鏡為好,有利于熒光的采集和成象的清晰。物鏡組的轉(zhuǎn)換,濾色片組的選取,載物臺(tái)的移動(dòng)調(diào)節(jié),焦平面的記憶鎖定都應(yīng)由計(jì)算機(jī)自動(dòng)控制。多功能顯微鏡以德國(guó)的蔡司zeiss和萊卡leica的產(chǎn)品為好,也常用日本的尼康nikon或奧林巴斯olympus產(chǎn)品。
+?[,{WtV eSlZAdK 2、掃描裝置
C=uYX" k7\
,No} lscm使用的掃描裝置有兩類,臺(tái)掃描系統(tǒng)和鏡掃描系統(tǒng),F(xiàn)在也有兩者結(jié)合使用的儀器。臺(tái)掃描通過步進(jìn)馬達(dá)驅(qū)動(dòng)載物臺(tái),位移精度可達(dá)0.lμm,能夠有效地消除成象點(diǎn)橫向象差,使樣品信號(hào)強(qiáng)度不受探測(cè)位置的影響,可準(zhǔn)確定位定量地掃描檢測(cè)視野中每一物點(diǎn)的光強(qiáng)度,缺點(diǎn)是載物臺(tái)機(jī)械移動(dòng)、圖象采集速度較慢。鏡掃描有雙鏡掃描和單鏡掃描兩種,通轉(zhuǎn)鏡完成對(duì)樣品的掃描。由于轉(zhuǎn)鏡只需偏轉(zhuǎn)很小角度就能涉及很大的掃描范圍,圖象采集速度大大提高,512×512畫面每秒可達(dá)4幀以上,有利于那些壽命短的離子作熒光測(cè)定,但因光路略有偏轉(zhuǎn)會(huì)對(duì)通光效率和象差有所影響。掃描系統(tǒng)的工作程序由計(jì)算機(jī)自動(dòng)控制。
afNqK~