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納米孔測(cè)序聯(lián)合光學(xué)測(cè)繪揭示轉(zhuǎn)基因植物細(xì)節(jié)

發(fā)布:cyqdesign 2019-01-26 11:58 閱讀:6051
索爾克的研究人員繪制了具有最高分辨率的轉(zhuǎn)基因植物系基因組和表觀基因組圖,為了精確地揭示插入一段外源DNA后,在分子水平上會(huì)發(fā)生什么。他們的研究結(jié)果發(fā)表在2019年1月15日的PLOS Genetics,闡明了用于修飾植物的常規(guī)方法,并為更有效地減少潛在的非目標(biāo)效應(yīng)提供了新思路。 )KhVUFS1  
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“這真是一個(gè)起點(diǎn),表明利用最新的繪圖和測(cè)序技術(shù)來研究插入基因后的植物基因組有何變化,”霍華德醫(yī)學(xué)研究所研究員、索爾克植物分子和細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室教授、基因組分析主管Joseph Ecker說。 *RE-K36m|u  
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為了基礎(chǔ)研究或促進(jìn)糧食作物健康和營(yíng)養(yǎng),當(dāng)科學(xué)家想把一個(gè)新基因插入植物中時(shí),他們通常依靠農(nóng)桿菌來完成這項(xiàng)任務(wù)。農(nóng)桿菌是引起冠癭瘤的細(xì)菌。早在幾十年前,科學(xué)家們發(fā)現(xiàn)了一顆感染細(xì)菌的樹,細(xì)菌將它的一些DNA轉(zhuǎn)移到了樹的基因組中。從那時(shí)起,研究人員就開始利用農(nóng)桿菌的這種轉(zhuǎn)移能力(轉(zhuǎn)移DNA,T-DNA)將所需基因轉(zhuǎn)移到植物中。 Cspm\F  
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最近,DNA測(cè)序技術(shù)暗示,當(dāng)農(nóng)桿菌T-DNA被用于植物轉(zhuǎn)基因時(shí),它可能會(huì)對(duì)本地DNA的結(jié)構(gòu)和化學(xué)性質(zhì)造成額外的改變。 @X><lz  
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“生物技術(shù)公司花費(fèi)了大量的時(shí)間和精力來描述轉(zhuǎn)基因植物的特征,忽視哪些有不必要的改變的候選者——從生物學(xué)的基本觀點(diǎn)來看——這些改變?yōu)樯稌?huì)發(fā)生?”Ecker說!拔覀兊男路椒ㄌ峁┝ 一種更好地了解這些影響的窗口,并有助于加快(育種)進(jìn)程! \ #c+vfq  
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“最大的未知是T-DNA以多少拷貝插入,是否如你所愿,”前索爾克研究助理,現(xiàn)在在拜耳作物科學(xué)公司工作的Florian Jupe說。 IMw)X0z  
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由于T-DNA可以將所需基因的許多拷貝整合到植物中,而大多數(shù)技術(shù)都難以對(duì)高重復(fù)片段進(jìn)行測(cè)序,因此很難用標(biāo)準(zhǔn)的DNA測(cè)序來研究最終結(jié)果。但是,Ecker和同事們轉(zhuǎn)向了一種新的組合方法——光學(xué)測(cè)繪納米孔測(cè)序——來觀察高分辨率的長(zhǎng)拉伸。他們將這項(xiàng)技術(shù)應(yīng)用于擬南芥的四個(gè)隨機(jī)選擇T-DNA系,這些植物源于大量的T-DNA插入突變體,這些突變體通常是以擬南芥轉(zhuǎn)化法(或稱花器浸蘸法)來研究基因功能而產(chǎn)生的。